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Nivel II

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Titular B

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DR. CARLOS EDUARDO HERNÁNDEZ LUNA

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DR. FRANCISCO GONZÁLEZ SALAZAR

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DR. LUCIO VERA CABRERA

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DR. Ramiro Quintanilla Licea

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José Antonio Heredia Rojas

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ADRIANA SAMPAYO REYES

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“Efecto de las proteínas de bajo peso molecular (< 10 kDa) obtenidas de los líquidos de ascitis provenientes de pacientes con neoplasias malignas sobre la producción de Factor de Necrosis Tumoral alfa por fagocitos humanos y células THP-1”.

El cáncer es una enfermedad que ocupa la segunda causa de muerte en el mundo. Dentro de las primeras causas de cáncer en mujeres también se encuentra el cáncer de ovario que se caracteriza por diagnosticarse en etapas avanzadas (con presencia de ascitis y derrame pleural), siendo una de las primeras causas de muerte por enfermedad ginecológica a nivel mundial. Estos padecimientos cancerosos se relacionan con una alta incidencia de producción de líquido en cavidades pleurales y peritoneales que confieren un mal pronóstico a los pacientes y una mala calidad de vida. Por lo que diagnosticar a los pacientes en etapas tempranas y encontrar nuevas terapias para los estadios avanzados son un reto actual en la Oncología. Desde hace varias décadas se cree que el Factor de Necrosis Tumoral-alfa (TNF-α) producido por los macrófagos contribuye a la defensa del huésped contra el desarrollo del cáncer. Sin embargo, dado que las propias células tumorales son capaces de producir TNF-α, es concebible que éste también pueda jugar un papel patológico adverso en la carcinogénesis. Hasta ahora, no existen estudios sobre la estimulación de fagocitos humanos con fracciones proteicas de bajo peso molecular de líquido de ascitis de pacientes con diferentes tipos de cáncer. Este estudio permitirá suponer y esclarecer uno de los mecanismos de evasión tumoral ya conocidos y posiblemente más adelante contribuirá a la identificación de nuevos biomarcadores tumorales. Se realizó la purificación parcial de los líquidos de ascitis mediante ultrafiltración con membranas de corte de 10 kDa, se determinó la cantidad de proteínas de cada muestra de pacientes cancerosos (líquido de ascitis), utilizando el método de determinación de proteínas de Lowry y se analizaron por su capacidad de producir TNF-α en dos sistemas, PBMC y células THP-1. Se demostró en esta tesis que las proteínas de bajo peso molecular provenientes de pacientes con diferentes cánceres produjeron TNF-α en los dos sistemas ya mencionados y que estos presentaron diferencias significativas estadísticamente con respecto al control. Y en algunos casos como se muestra en los resultados de esta tesis el TNF-α producido tanto por los fagocitos como los THP-1 fue mayor cuando estos fueron estimulados con las fracciones tumorales que cuando fueron estimulados solo por el control de activación, LPS.

COMPARACION DE DIFERENTES MEDIOS DE CULTIVO PARA IDENTIFICACIÓN MORFOLOGICA Y VALIDACION POR PCR TIEMPO FINAL DE TRICHOMONA VAGINALIS CON TRATAMIENTO VERSUS SIN TRATAMIENTO.

La Tricomoniasis vaginal es una de las enfermedades de transmisión sexual que se presenta con más frecuencia a nivel mundial. El agente etiológico es Trichomona vaginalis, protozoo flagelado y su huésped natural es el ser humano causando complicaciones principalmente en la mujer embarazada afectando por ende a la madre y el producto y en la mujer con vida sexual activa .En la mayoría de los laboratorios clínicos (bacteriológicos) las muestras de elección para el diagnóstico de Trichomona. vaginalis ha sido usando la secreción vaginal, la cual es trasportado usando un amortiguador en base a fosfatos (PBS, por sus siglas en ingles) y analizado como frotis húmedo bajo el microscopio y ser determinado por una persona experta. En ningún laboratorio se usa medios de cultivo para el diagnóstico primario de Trichomona vaginalis. Objetivo comparar los diferentes medios de cultivo para identificación morfológica y validación por PCR tiempo final de Trichomona vaginalis con tratamiento versus sin tratamiento. Material y métodos diseño cuasi experimental universo de estudio mujeres embarazadas y no embarazadas referidas por infección vaginal con toma de cultivo vaginal en nuestro laboratorio con hisopo y transporte para su diagnóstico en el medio tradicional PBS y otros medios de cultivo como el TYS-S-33 (o Diamond), PEHPS y un medio nuevo elaborado a base de extracto de pulmón de cerdo LUPS, con formación de dos grupos: Grupo A: control. Mujeres con infección vaginal y cultivo vaginal en medio de transporte y con dos grupos con tratamiento, sin tratamiento y su identificación por PCR tiempo final Grupo B: experimental: Mujeres con infección vaginal y cultivo vaginal en medios de cultivo TYI-S-33, PHEPS y LUPS, y con dos grupos con tratamiento, sin tratamiento y su identificación por PCR tiempo final Resultados. Se realizó un estudio cuasi experimental en el que se incluyeron 120 mujeres embarazadas y no embarazadas, que acudieron a la Unidad Médica de Alta Especialidad N° 23 Hospital de Gineco Obstetricia Dr. Ignacio Morones Prieto IMSS Monterrey N.L. en el periodo Junio - Noviembre 2019 con el objetivo de en mujeres embarazadas y no embarazadas que asistieron a consulta externa se compararan de diferentes medios de cultivo para identificación morfológica y validación por PCR tiempo final de Trichomona vaginalis con tratamiento vesrsus sin tratamiento Para la recolección de la información se utilizó un cuestionario con preguntas cerradas y consentimiento informado, toma de muestras vaginales a las mujeres en estudio. Entre los resultados obtenidos, se encontró, que de las 120 mujeres el ,60% eran mujeres embarazadas en edad reproductiva 20-35 años y en menor proporción eran adolescentes 16 y 19 años (5%) Grupo de mujeres embarazadas en etapa reproductiva en esta población gran parte son citadinas y un bajo porcentaje es referida de áreas rurales la mayoría están casadas, la mitad de ellas eran trabajadoras y un 38% eran amas de casa y en menor proporción eran estudiantes con un nivel socioeconómico bajo se encontró un factor de riesgo para el incremento de infecciones vaginales de repetición es la adicción al tabaco en un 25%. En la vigilancia de su embarazo la mayoría llevaban un adecuado control de este y nuestra población de estudio la mayoría ya habían tenido un embarazo anterior con antecedente de infecciones vaginales y referidas a nuestro hospital en el último trimestre de su embarazo referida con un cuadro clínico de leucorrea en el 41% presentando dispareunia 72%, prurito vaginal 51% y disuria 38% y referidas la mayoría con tratamiento para esta infección en el 57% Grupo de mujeres sin embarazo de la consulta de ginecología en etapa reproductiva en esta población gran parte son citadinas y un bajo porcentaje es referida de áreas rurales la mayoría están en unión libre , la mitad de ellas eran trabajadoras y un 17% eran estudiantes y en menor proporción eran amas de casa con un nivel socioeconómico medio se encontró un factor de riesgo para el incremento de infecciones vaginales de repetición es la adicción al tabaco en un 43% con antecedente de infecciones vaginales y referidas a nuestro hospital en el último trimestre de su embarazo referida con un cuadro clínico de leucorrea en el 64% presentando dispareunia 83%, prurito vaginal 71% y disuria 58% y referidas con infecciones de repetición y multitratadas la mayoría con tratamiento para esta infección en el 57% La parte medula de nuestro estudio es la propuesta de medios de cultivo para aumentar la detección de Trichomona vaginalis en estas pacientes buscando el medio de cultivo con mejor crecimiento y duplicación de Trichomona vaginalis en menor tiempo Los medios de cultivo presentaron curvas de crecimiento y duplicación TYI-S-33 fue de 3.77 h en PHEPS la duplicación fue 3.75 h y en nuestro nuevo medio LUPS la duplicación fue en menor tiempo 3.25 h en nuestro estudio los resultados fueron importante para el diagnóstico de Trichomona vaginalis por medio de cultivo por PCR fueron 20% y en laboratorio fue 2.6% (tabla 5). Se logró el crecimiento en los tres medios de cultivo TYI-S-33, PEHPS Y LUPS La cinética de crecimiento de Trichomona vaginalis fue a las 48 a 72 horas obteniendo un patrón de crecimiento similar y no se encontraron diferencias significativas (p< 0,05). Otro punto relevante de nuestro estudio es la identificación de Trichomona vaginalis para su diagnóstico ya que al paso de unas horas pierde su movilidad y capacidad de diagnóstico al microscopio. En cuanto a la morfología realizada en el microscopio de luz, con el método convencional de PBS se demostró una proporción muy baja de presencia Trichomona vaginalis de 120 mujeres incluidas solo en 1 mujer embarazada se logró el diagnostico en nuestro estudio demostramos en el nuevo medio LUPS y otros medios de cultivo TYI-S-33, PEHPS el crecimiento de esta en 23 pacientes con confirmación de su presencia con PCR .Conclusión: En este estudio el diagnóstico clínico no se encuentra diferencia con el uso tratamiento que sin él y los medios de cultivo TYI-S-33, PEHPS y LUPS puede representar una buena alternativa económica para el transporte y diagnóstico de Trichomona vaginalis en los laboratorios para tener una mayor eficiencia del 96 % mayor en la identificación de contra el frotis tradicional con PBS.

Comparación de la actividad hemolítica y fosfolipásica A2 de Trichomonas vaginalis cultivada en presencia y ausencia de vitaminas 107 de Diamond.

Es posible que la presencia de la mezcla vitamínica 107 de Diamond en el crecimiento de trofozoítos de Trichomonas vaginalis pueda contribuir en un aumento de la actividad hemolítica y fosfolipásica A2 producida por el extracto total y las fracciones subcelulares de S30 y P30 de tricomonas vaginalis. OBJETIVO GENERAL Comparar la actividad hemolítica y fosfolipásica A2 en el extracto total y las fracciones subcelulares S30 y P30 de trofozoítos de Trichomonas vaginalis cultivados en presencia y ausencia de vitaminas 107 de Diamond. OBJETIVOS PARTICULARES I. Cultivo axénico de la cepa GT-15 en medio PEHPS adicionado con 9% de suero bovino y en presencia (PEHPS-CV) y ausencia (PEHPS-SV) de vitaminas 107 de Diamond. II. Elaborar curvas de crecimiento de T. vaginalis cepa GT-15 en presencia y en ausencia de vitaminas 107 de Diamond. Evaluar sus parámetros de crecimiento (tiempo de duplicación, tiempo de generación, intercepto en la curva, pendiente y r2 – coeficiente de determinación) en el medio de cultivo PEHPS adicionado con suero. III. Obtención del extracto total y de las fracciones S30 y P30 de la cepa GT-15 cultivada en PEHPS-CV y PEHPS-SV. IV. Determinación de la concentración de proteínas por el método de lowry. V. Cuantificación y comparación de la actividad hemolítica del extracto total y las fracciones obtenidas en PEHPS-CV y PEHPS-SV, en cuanto al tiempo y la dosis-respuesta para obtener la dosis hemolítica 50 (DH50). VI. Cuantificación y comparación de la actividad fosfolipásica tipo A2 del extracto total y de las fracciones obtenidas en PEHPS-CV y PEHPS-SV. VII. Análisis estadístico de los resultados obtenidos.

  • Doctorado 1991
    UNIVERSIDAD AUTONOMA DE MEXICO
    Título: Doctor en Investigación Biomédica Básica Institución: Unidad Académica de los Ciclos Profesionales y de Postgrado del Colegio de Ciencias y Humanidades (CCH, UNAM). Fecha: 1987-1991. Ciudad: Cuernavaca, Morelos Promedio: 9.5. Lugar del Examen: Instituto de Biotecnología. Cuernavaca, Morelos. Fecha: 22 de Marzo de 1991. Título de la Tesis: Aislamiento y Caracterización de una Fosfolipasa A2 de Entamoeba histolytica con Actividad Lítica Directa.
  • Maestría 1984
    UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON
    Título: Maestro en Ciencias con Especialidad en Biología Celular. Institución: Facultad de Ciencias Biológicas (U.A.N.L). Fecha: 1982-1984 Promedio: 9.2. Lugar del Examen: Facultad de Ciencias Biológicas (U.A.N.L). Fecha: 22 de abril de 1985. Título de la Tesis: Caracterización de la Principal Actividad Fosfolipásica de Entamoeba histolytica.
  • Licenciatura 1982
    UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON
    Químico Bacteriólogo Parasitólogo. Institución: Facultad de Ciencias Biológicas (U.A.N.L). Fecha: 1977-1982. Promedio: 9.0. Lugar del Examen: Facultad de Ciencias Biológicas (U.A.N.L). Fecha: 31 de enero de 1983. Título de la Tesis: Detección de la Actividad Citolítica de Extractos Entamoeba histolytica Sobre una Línea Celular de Mamífero.

Ligas de interés